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倒置显微镜如何正确使用呢

发布时间:2019/12/3

        倒置显微镜是用于生物科学研究领域的多功能显微镜,其结构复杂且价格昂贵,因此,要想医学研究生正确掌握倒置显微镜的操作使用规范,教师得首先在示范倒置显微镜的实际操作之前,开设学习倒置显微镜基本知识的课程,介绍倒置显微镜的结构、原理、功能和基本使用方法,再在具体的使用操作中,针对不同的标本,示范不同的功能,由浅入深,逐渐使医学研究生对倒置显微镜的操作使用规范化。

       倒置显微镜如何正确使用呢,下面来介绍一下:

1.明视野观察的正确使用。倒置显微镜的功能之一是明视野观察,其基本原理是标本经光线照射后,各部分对光吸收的不同而在明亮的背景中实现成像,主要适用于经染色或本身具有颜色的细胞、组织切片等标本的观察。

2.相差观察的正确使用。倒置显微镜的功能之二是相差观察,其基本原理是将样本不同部分的光程差转变为振幅差,经过带有相位片的相差物镜和带有环状光阑的聚光镜实现观测,主要适用于活细胞或不染色的组织切片观察,在实验教学过程中,除了正确引导医学研究生遵守相差观察的基本操作方法,同时更为重要的是引导他们对使用相差观察的标本认识和掌握。对他们来说,在日后的科学研究中,为常用的是培养细胞的显微观察。首先,对于细胞器材的选择,一般建议使用玻璃材质和塑料材质的培养皿、培养板和培养瓶。它们多为无色透明,可直接在倒置显微镜上进行观察,不用倒掉细胞液和经过其他处理。其次,在进行显微观察中,不要随意打开器材的盖子,以免污染细胞后,对于操作人员来说,需佩戴手套、口罩和白大衣,不仅可以保护自身健康而且可以防止细胞污染。

3.观察的正确使用。倒置显微镜的功能之三是观察,其基本原理是利用激发光激发样本产生,从而实现样本的形状与定位观察,主要适用于标记样本的观察。观察是倒置显微镜的重要功能,其配件昂贵且使用特殊。要想医学研究生正确地掌握观察的操作使用规范,教师除了教会他们掌握基本的操作方法,同时更为重要的是教会他们掌握它的特殊性。首先,在标本制作中,载玻片和盖玻片应表面光洁且厚度适宜(载玻片在0.8mm~1.2mm之间,盖玻片在0.17mm左右);标本应厚度适宜,同时避免细胞重叠或杂质掩盖;封裱剂应使用甘油和碳酸盐缓冲液(0.5mol/LPH9.0~9.5)的等量混合液。其次,在观察前,应关闭房间内的电灯和倒置显微镜的白光,确保处于暗室环境。后,在观察中,应严格控制观察时间,一般以1~2小时/次为宜,否则会出现衰减和消失的现象;调整光源时应佩戴防护眼镜,避免紫外线对眼镜的伤害。

4.图像拍摄的正确使用。在科学研究中,不仅要求倒置显微镜可以实现多种观察,而且要求倒置显微镜可以实现图像拍摄。倒置显微镜系统通过光电转换将光学显微镜与计算机结合在一起,不仅可以在目镜上进行显微观察,而且可以在计算机上进行实时动态图像的观察、编辑和保存。



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