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普通光学显微镜拍摄小型昆虫

发布时间:2020/11/17

通常观察昆虫的形态结构使用的是体视显微镜体视显微镜又称实体显微镜,由于采用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角,即体视角(一般为12 °-15°),因而能形成三维空间的立体图像,具有立体感强、成像清晰宽阔(景深大)、长工作距离(通常为110mm,便于解剖操作)同时可连续放大观看样品。生物学上体视显微镜常用于解剖过程中的实时观察。在观察小型昆虫(3mm以下,虫体不透明)时,由 于解剖镜放大倍率一般在8-100倍之间,常常无法看清昆虫一些细微结构,而普通生物显微镜一般有多个镜头可更换,放大倍率50-1000倍左右,大大提高了分辨率。作者通过对普通光学显微镜的光路的改变,以及景深扩展软件的配套应用,使利用普通光学显微镜就能拍摄到高清、立体小型昆虫图像的愿望成为现实。现将方法介绍如下:



1、改变光路

     普通光学显微镜的光源一般设在载物台下方的底座上,为透射光路l2 J,光从下方透射穿过观察物进入物镜,因此,普通光学显微镜的镜检对象必须是透明的,且制作成装片后 方可放在载物台上观察。当镜检的对象不透明时,必须改变光路,关闭普通光学显微镜原有的光源,或用卡纸挡住普通光学显微镜原有的采光系统, 取而代之,在镜检对象上方添加新的照明光源。可以自 制小型冷阴极环形照明灯,通过旋钮套扣在物镜上,使光线从上方透射到镜检对象上,从而使不透明的镜检物也可以在普通光学显微镜上观察。不足之处:(1)不能连续变倍观察,需要通过更换物镜镜头,方可改变放大倍率,此时,必须先将套扣在物镜上外接光源卸下,才可以更换物镜;(2)物镜与镜检对象之间的距离很短(小于10mm),往往不便进行复杂的解剖操作。

2、分层拍摄

     使用光学显微镜观察昆虫标本时,因昆虫是立体的,往往都超出了显微镜的景深范围(约1-100μm),这时获取到的昆虫图片就只能是局部清晰的,该如何去解决呢?首先通过调节显微镜达到样品的不同聚焦层面(这里注意调焦步距要小于景深,若大于景深就会有信息遗失),然后将所有这些层面的图像用数码成像设备拍摄并传输到计算机(这些层面图像中的每一幅都有不同于其他图像的清晰部位,它们分别记录了样品不同部位的形貌和颜色信息),最后经过专用图像处理软件的分析、融合,最终得到一幅全清晰的高品质图片。

3、立体合成

     光学系统受景深小的物理性能限制,对纵向变化范围较大的物体,所拍图片为局部清晰。利用景深扩展软件,将序列图像聚焦清晰的部分提取 ,并合并出一幅清晰、逼真、富有立体感的图像。图像合成过程不做额外的处理和变换,保证了最终图像的真实性。

上海谱骞光学仪器有限公司(http://www.shpqyq.com)是国内一家显微镜(光机电)研发、营销,售后服务为一体的专业光学设备仪器公司。并同时代理国外光学品牌仪器知名品牌,并保持 着良好的合作关系,公司有专业的销售及售后服务团队,能为用户提供完善的解决案和系统的培训。主营:金相显微镜生物显微镜体视显微镜倒置显微镜视频显微镜、荧光显微镜、偏光显微镜等。

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